當(dāng)前位置：上海恒遠生物技術(shù)發(fā)展有限公司 > 產(chǎn)品中心 > ELISA試劑盒 > 兔ELISA試劑盒 > 兔SP試劑盒（兔鏈霉卵白素-生物素法檢測系統(tǒng)）

聯(lián)系我們/CONTACT US

聯(lián)系人：錢經(jīng)理

電話：13636351217

手機：13636351217，13636351073

地址：上海市松江臨港科技城漢橋文化科技園B座

郵編：201615

傳真：021-64881400

郵箱：2881726255@qq.com

阿儀網(wǎng)商鋪：http://www.app17.com/c60514/

手機網(wǎng)站：m.shhyswkj.com

產(chǎn)品分類/PRODUCT CLASS

產(chǎn)品簡介

兔SP試劑盒（兔鏈霉卵白素-生物素法檢測系統(tǒng)）

價格： 5420

采購度：1216 原產(chǎn)地：中國大陸

發(fā)布時間：2018/11/16 9:29:46

兔SP試劑盒（兔鏈霉卵白素-生物素法檢測系統(tǒng)）兔SP試劑盒（兔鏈霉卵白素-生物素法檢測系統(tǒng)）檢驗原理：生物素標(biāo)記的山羊抗兔IgG聚合物與結(jié)合在組織片上的一抗反應(yīng)形成免疫復(fù)合物，辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素與生物素免疫復(fù)合物結(jié)合進一步形成聚合物，聚合物上的辣根酶（HRP）催化顯色底物（DAB或AEC）形成不溶性色原，從而在顯微鏡下顯示出組織片中的特定抗原的位點。

分享到：

標(biāo)簽：兔SP試劑盒 兔鏈霉卵白素-生物素法檢測系統(tǒng)

詳細信息

存儲條件：

2~8℃暗處保存。

檢驗原理：

生物素標(biāo)記的山羊抗兔IgG聚合物與結(jié)合在組織片上的一抗反應(yīng)形成免疫復(fù)合物，辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素與生物素免疫復(fù)合物結(jié)合進一步形成聚合物，聚合物上的辣根酶（HRP）催化顯色底物（DAB或AEC）形成不溶性色原，從而在顯微鏡下顯示出組織片中的特定抗原的位點。

試劑盒內(nèi)容：

包裝規(guī)格：	3mL	6mL	18mL	55mL	110mL
試劑1：內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑	3mL	6mL	18mL	55mL	110mL
試劑2：封閉用正常山羊血清工作液	3mL	6mL	18mL	55mL	110mL
試劑3：生物素標(biāo)記山羊抗兔IgG聚合物	3mL	6mL	18mL	55mL	110mL
試劑4：辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液	3mL	6mL	18mL	55mL	110mL

檢驗方法：

1、檢驗所需儀器、設(shè)備：移液器、恒溫箱、修復(fù)儀、免疫組化筆、計時器、孵育盒、染色架、蓋玻片、光學(xué)顯微鏡、洗瓶。
2、試劑準(zhǔn)備：DAB顯色液需要在使用前配制。
3、操作程序：
a) 脫蠟和水化
石蠟切片置于新鮮二甲苯中，浸泡10分鐘×3次；去除多余的液體后，置于無水乙醇中，浸泡3分鐘×3次；去除多余的液體后，置于95%乙醇中，浸泡3分鐘×2次；去除多余的液體后，置于75%乙醇中，浸泡3分鐘×2次；蒸餾水沖洗1分鐘，置于PBS緩沖液中。
b) 抗原修復(fù)，參見一抗說明書。
c) 阻斷內(nèi)源性過氧化物酶
加入適量的內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑，室溫孵育10分鐘；PBS緩沖液沖洗3分鐘×3次。
d) 滴加封閉用正常山羊血清工作液
滴加100μL或適量的封閉用正常山羊血清工作液，室溫孵育10~15分鐘，傾去血清，勿洗。
e) 滴加一抗
根據(jù)組織大小，滴加100μL或適量的一抗，37℃孵育60分鐘；PBS緩沖液沖洗3分鐘×3次。
f) 滴加生物素標(biāo)記山羊抗兔IgG聚合物
滴加100μL或適量的生物素標(biāo)記山羊抗兔IgG聚合物，室溫孵育10~15分鐘；PBS緩沖液沖洗3分鐘×3次。
g) 滴加辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液
滴加100μL或適量的辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液，室溫孵育10~15分鐘；PBS緩沖液沖洗3分鐘×3次。
h) 顯色
加入適量新鮮配制的DAB或AEC顯色液，室溫孵育5～8分鐘。
i) 復(fù)染
自來水沖洗，蘇木素染色液孵育20秒；分化、沖洗返藍。
j) 脫水、透明、封片
k) 閱片。
4、結(jié)果判定，染色結(jié)果須由有資質(zhì)的病理醫(yī)生對染色后的組織片在光學(xué)顯微鏡下觀察并進行判讀。

檢驗結(jié)果的解釋：

1、抗原修復(fù)、孵育時間、溫度的修改或使用其他方法均有可能得出錯誤結(jié)果。
2、在每一次染色過程中，必須有空白對照和陰性對照實驗同時進行。
3、如果陽性組織對照不能顯示適當(dāng)?shù)年栃匀旧�，�?yīng)判定該批次樣本的檢測結(jié)果無效。
4、若生物素標(biāo)記山羊抗兔IgG聚合物和辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液孵育溫度過高或孵育時間過長，可能導(dǎo)致染色過強及背景染色。

檢驗方法的局限性：

1、免疫組織化學(xué)染色是一種需通過多個操作步驟完成的檢測過程。在組織前期處理和實驗過程中的不規(guī)范操作，有可能影響實驗結(jié)果。
2、專業(yè)的操作人員、經(jīng)過認證的實驗室和標(biāo)準(zhǔn)化的實驗流程，可以減少各種外界因素造成的操作偏差。
3、紅細胞和細胞色素 C可能會造成假陽性結(jié)果。
4、某些組織中內(nèi)源性生物素含量比較高，可能導(dǎo)致染色過強及背景染色。
5、陰性結(jié)果表示未檢出抗原，不一定表示樣本中無該抗原存在。待測抗原編碼基因變異、抗原低表達或抗原修復(fù)不當(dāng)?shù)�，都會造成抗原無法檢出。
6、本試劑僅對10%中性緩沖福爾馬林固定石蠟包埋的組織進行了驗證，不作其他用途。

產(chǎn)品性能指標(biāo)：

1、裝量：試劑盒各組份的溶液裝量應(yīng)不少于標(biāo)示裝量。
2、符合性：取符合性組織片（包括陽性組織對照和陰性組織對照），經(jīng)相應(yīng)的免疫組化實驗后，應(yīng)陽性著色定位準(zhǔn)確，且無背景染色；同時，空白對照和陰性對照染色結(jié)果為陰性。
3、批內(nèi)重復(fù)性：取同一批次的試劑盒，檢測組織片3片，染色強度和定位無明顯差異。

標(biāo)本染色：

1. 石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。
2. 如需采用抗原修復(fù)，在此步驟后進行。
3. 3% H2O2去離子水（無色液體）孵育5~10分鐘，以消除內(nèi)源性過氧化物酶活性。PBS沖洗，3分鐘 3次。
4. 滴加試劑A（藍色液體）室溫孵育10~15分鐘，傾去，勿洗。
5. 滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2~3小時或4℃過夜。
6. PBS沖洗，3分鐘 3次。
7. 滴加試劑B（黃色液體）室溫或37℃孵育10~15分鐘。
8. PBS沖洗，3分鐘 3次。
9. 滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃孵育10~15分鐘。
10. PBS沖洗，3分鐘 3次。
11. 顯色劑顯色（DAB或AEC）。
12. 自來水充分沖洗。
13. 如果需要，可進行復(fù)染，脫水，透明。
14. 選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>

更新時間：2024/9/29 9:06:48

在線留言

在線咨詢，尊敬的客戶您好，我們會盡快回復(fù)您的咨詢！

您感興趣的產(chǎn)品*		您還沒有輸入您感興趣的產(chǎn)品
您的單位*		您還沒有輸入您的單位
聯(lián)系人*		您還沒有輸入聯(lián)系人
聯(lián)系電話*		您還沒有輸入聯(lián)系電話
詳細地址
常用郵箱		您輸入的郵箱格式不正確
請輸入您對我們的意見或建議*		您還沒有輸入您對我們的意見或建議
驗證碼*		您還沒有輸入驗證碼