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公司新聞

脂肪酶活性測定方法

閱讀次數(shù)：1418 發(fā)布時間：2012/9/20 9:03:21

上海恒遠(yuǎn)主要經(jīng)營的產(chǎn)品有elisa試劑盒，生物試劑，標(biāo)準(zhǔn)品，血清，抗體，培養(yǎng)基，細(xì)胞，歡迎各位前來咨詢。

方法：

1、粗酶液的制備

用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g，用蒸餾水溶解并定容至100 mL，配成濃度分別為0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。

2、實驗設(shè)計

本實驗以10 mL色拉油為底物，以酶用量、水解溫度、反應(yīng)時間為因素，通過酸價的測定選定其水解的*佳條件。

3、酸價的測定

酸價是指中和1 mol游離脂肪酸所需NaOH的毫克數(shù)，它用于衡量油脂的水解程度。實驗中用酸堿滴定法測定水解液的酸價，參照文獻[ 3， 4 ]中所使用的方法，向所得的水解液滴加1 mL 95%的乙醇溶液，搖勻，終止反應(yīng)，并加入2滴酚酞指示劑，迅速用0.05 mol/L的NaOH溶液滴定至溶液呈微紅色，在30 s內(nèi)不消失為終點，記錄消耗的NaOH溶液毫升數(shù)（V ）。用同樣的方法測定空白值，每個試驗重復(fù)兩次，以平均值作為測定結(jié)果。

酸價按下式計算：
X = C （V - V0 ） ×40 /M
式中: X —油脂酸價（mgNaOH /g油）
C—NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol/L）
M —試樣的質(zhì)量（ g）
40—NaOH的mmol質(zhì)量（mg/mmol）

4 粗脂肪酶活力的測定

在*佳水解條件下，分別測得粗脂肪酶和標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶水解液的酸價X1、X2 ，根據(jù)公式U1 /U= X1 / X2求得粗脂肪酶的活力，其中U1為粗脂肪酶活力， U為標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶活力。

5標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶液的配制

根據(jù)實驗*佳條件，配制標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶液。一篇相關(guān)文獻粗脂肪酶活力的測定方法的研究.pdf

答：實驗設(shè)計，本實驗以10 mL色拉油為底物，以酶用量、水解溫度、反應(yīng)時間為因素，通過酸價的測定選定其水解的*佳條件。用色拉油作底物不太妥，一般是用橄欖油，化學(xué)純的。