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公司新聞

脂蛋白的分離

閱讀次數(shù):1653   發(fā)布時間:2012/9/10 9:01:42

昆蟲有一個開放的循環(huán)系統(tǒng)血液可以簡單地通過一個切口在身體。*方便的,你應(yīng)把一條腿讓血滴到冷的玻璃燒杯。以獲得的收益,這是必要的,排除血液注入緩沖進入體腔實驗過程是下圖所示。

搬遷后的血細(xì)胞,溴化鉀添加到形成44%個解決方案。這是分層與磷酸鹽緩沖液(公共廣播公司,形成一個密度梯度離心。*終,所有的蛋白質(zhì)上浮或下沉的區(qū)域對應(yīng)的密度有一個低密度脂蛋白,黃色漂浮高于non-lipoproteins包括綠色cyanoprotein。分離蛋白是分離。對個人的分?jǐn)?shù),密度是由折射率,蛋白質(zhì)含量和組成Brad ford法和電泳,分別,脂質(zhì)成分可以分析薄層和氣相色譜法。

實驗議定書

1天出血和離心。

2天分餾,折射率和透析。

3天凍干

1天:出血和離心。

注意:你需要戴上手套,整個程序。

每一需要10 - 15蝗蟲。

1。2 - 5毫升的公共電視網(wǎng)在一個干凈的100毫升燒杯和添加25µ升200毫米磺酰氟

注意安全。劇毒的!

2。流血蝗蟲持有所有的腿和翅膀一條腿靠近胸部見圖片)。確保沒有昆蟲的唾液進燒杯已經(jīng)準(zhǔn)備好紙巾口水)。

3。輕輕注入幾百微升通過部分皮下。

不要傷害腸道!。

4。沖洗胡蘿卜素仔細(xì)進行擠壓胸腔部位輕輕。收集血液從10 - 12蝗蟲。

5。流血蝗蟲在罐子里當(dāng)完成了出血,movet罐子的電冰箱。處理過動物尸體在稍后的日期

6。使解決~ 15毫升與公共電視網(wǎng)。

7。添加8.9克溴化鉀晶體,輕輕地攪拌,用干凈的攪拌棒。

8。溶解部分轉(zhuǎn)移到50毫升量筒和添加更多2 - 3毫升)公共廣播溶解溴化鉀攪拌至溶解。游泳池這些解決方案,高達(dá)20毫升攪拌進一步測量筒

9。轉(zhuǎn)移30毫升塑料注射器由夾子連接到18針針和毛細(xì)管見圖片)

10。流進熱密封的離心管

11。另加20毫升注射器進入覆蓋的。

12。又熱封口溫暖起來。

13。平衡樣本來自其他組;必須精確分析天平、添加或刪除公共電視網(wǎng)或從。如果液體是在脖子上,去除尖端組織。

14。金屬帽的,密封的熱封口機一旦上限達(dá)到管的肩膀,快速移動的權(quán)利和與散熱片

15。將四積分50轉(zhuǎn)子相對位置和地點,超速離心機轉(zhuǎn)子。

16。確保蓋關(guān)閉。打開真空離心機設(shè)置運行的條件10℃,剎車45000,時間4.5 h。

17。旋轉(zhuǎn)45000轉(zhuǎn)為4.5小時留樣一夜之間在離心機的。

2天:檢索樣本

(約2 - 3小時連續(xù)

1。運行后結(jié)束,真空,等到壓力達(dá)到大氣壓力。現(xiàn)在您可以刪除。

2。注意任何不尋常的觀察期間或之后,法離心(例如,泄漏),并記錄在離心機的書清潔室和轉(zhuǎn)子,并開始排練避免凝結(jié)在離心機。

3。用一把鋒利的單刃剃刀仔細(xì)剪開離心管。

4。建立biorad餾分收集器。內(nèi)容20毫升的組分分餾。

5。確定密度使用折射計。

6。同時測定紫外吸光度在280納米記得使用uv-permeable塑料試管(1對)。

7。確定的折射率發(fā)生2透析管每個約20厘米長)到500毫升的燒杯中充滿了區(qū)。

8。離開一個整除(300µ升)每一部分標(biāo)記修改離心透析。

9。透析~ 1升區(qū)水在寒冷的房間,改變緩沖區(qū)的一次

10。小心將整體攜脂組分(通常是3 - 5黃色分?jǐn)?shù))進入透析管關(guān)閉了在底部有一個橙色鉗)使用巴斯德吸管。

11。關(guān)閉透析,確保留下足夠的擴展空間,在透析。

12。透析4升區(qū)水在寒冷房間里過夜。改變水和重復(fù)撥號

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