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技術(shù)文章

恒遠為您總結(jié)ELISA實驗失敗的原因

點擊次數(shù)：14735   發(fā)布時間：2021/2/3 9:45:49

elisa試劑盒實驗也同樣如此，成功的實驗是個循序漸進的過程，影響ELISA實驗結(jié)果的因素有很多，只有的掌握了實驗的細節(jié)，才能購做出完美的實驗。您可知您的ELISA試劑盒實驗為什么會失��？天文章的內(nèi)容中，小編將為您找找其中的原因。
 
第yi、標本的影響
    溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性�？赡苁侨苎逯泻羞^氧化酶物質(zhì)（紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），在洗滌過程中往往難以完全洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍色，產(chǎn)生假陽性。所以嚴重溶血標本禁用。
 
第二、標本受細菌污染
    因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌污染的標本同溶血標本樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
 
第三、標本保存不當
    在冰箱中保存過久的標本，在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、造成假陽性；為克服上述干擾，ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集；如不能立即測定，5d內(nèi)測定的血清標本可存放于4
℃，1周后測定的血清標本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標本，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混合后再測定，但混勻時應(yīng)輕柔，不可強烈振蕩。
 
第四、標本凝固不全
    在工作中，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果；因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。 
 

原創(chuàng)作者：上海恒遠生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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