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技術(shù)解析:ELISA實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性、陽性和空白對照的重要作用

點(diǎn)擊次數(shù)：15092 發(fā)布時間：2016/6/7 9:43:04

ELISA檢測，要求嚴(yán)格按照試劑說明書要求，每次試驗(yàn)、每塊扳上都要設(shè)置以下3項(xiàng)對照和用途下面我司技術(shù)為您詳細(xì)介紹ELISA實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性、陽性和空白對照的作用：
1．空白對照：僅用稀釋液代替檢測樣本、用以觀測*終反應(yīng)的顯色“本底"、并用于酶標(biāo)儀消除、扣除“本底"，即：以本底為“零"讀取陽性、陰性對照孔和樣本檢測孔的吸光值（A）；或者，在計(jì)算陰性對照均值（NCx）、陽性對照均值（PCx）、樣本讀數(shù)的S/C.O.值時減去空白對照的本底吸光值。
2．陰性對照（品）：所謂陰性對照（品），應(yīng)當(dāng)是本項(xiàng)檢測試驗(yàn)中采用與待撿物（樣品、人用試劑就是人的血清等）具有同源性和同質(zhì)性，又不含有待檢物質(zhì)，并能客觀比較和鑒別處理因素（血清免疫學(xué)試驗(yàn)中有特異性抗原與抗體反應(yīng)）之間的差異。
3．陽性對照（品）：
（1）陽性對照（品）的概念與要求：同陰性對照（品），只是采用“精選"的含有待檢物質(zhì)的人血清制備而成。所謂“精選"，就是把收集的陽性人血清經(jīng)過數(shù)種試驗(yàn)進(jìn)行“篩試"、把含有“干擾性物質(zhì)"的血清剔除、不用，以避免出現(xiàn)“假陽性"干擾試驗(yàn)結(jié)果。
（2）陽性對照（品）設(shè)置，也可區(qū)分為兩種類型與用途：
一是陽性對照主要用于評價該項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果是否有效和試驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與可比性。而所設(shè)的陽性對照的測量值不列入Cut off值計(jì)算、但是不可不做。如HBsAg、抗—HBs、HBeAg等。
二是陽性對照的設(shè)置，不僅用于評價試驗(yàn)結(jié)果是否有效和試驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與可比性，而且計(jì)入Cut off的計(jì)算。此時的Cut off值的含義是代表該標(biāo)志物在健康（正常）人群中正常值范圍的上限。待檢樣本檢測值超過該上限（Cut off）時表示有診斷意義。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司